生物安全柜操作

潔凈實驗室生物安全柜操作及使用方法

生物安全柜合理定期維護注意事項

合理定期的維護對維護任何設備的正常工作都是至關重要地，這一點對生物安全柜也不例外。按照下面推薦的維護日程表對安全柜進行維護，保持其性能。為您介紹潔凈實驗室生物安全柜操作及使用方法。

一．每日維護

1）用70%的酒精（其他殺菌劑視用戶使用的材料而定）*對安全柜內部工作區域表面、側壁、后壁、窗戶進行表面凈化。不要用含有氯的殺菌劑，因為它可能對安全柜的不銹鋼結構造成損壞。也要對紫外燈和電源輸出口表面進行清潔。當清潔安全柜內部區域時，操作人員除了手放以外，身體的其他任何部位不能進入安全柜。

2）檢查警報并檢測基本氣流

二．每周維護

1）用70%的酒精（其他殺菌劑視使用的材料而定）*對排水槽進行清洗

2）檢查殘留物質

三．每月維護

1）用濕布對安全柜外部表面進行擦拭，尤其是安全柜的前面和上部，把堆積的灰塵打掃干凈。

2）檢查所有的維護配件的合理使用情況。

3）上述每日工作中的條目

四．每季維護

1）檢查安全柜的任何物理異?；蚬收?。檢查熒光顯像管確保它們工作正常

2）當不銹鋼上表面有難以去除的斑點時，可以使用MEK（methyl-ethyl-ketone）。使用WEK后，快速用清水和液體清潔劑沖洗不銹鋼板，并且用聚亞安酯布或者海綿進行擦拭。定期清潔不銹鋼表面會使之保持表面的光滑美觀。

五．每年維護

1）具備資格的認證技術人員對安全柜進行性能認證。

2）更換紫外燈

3）上述的每季維護

生物安全等級

生物安全等級P1

進行試驗研究用的物質都是已知的,所有特性都已清楚并且已證明不會導致疾病的多種微生物物質。研究通過日常的程序在公開的實驗臺面上進行。不需要有特殊需求的安全保護措施。操作人員只需經過基本的實驗室實驗程序培訓并且通常由科研人員指導，在這樣的環境下并不需要生物安全柜的存在。

生物安全等級P2

進行試驗研究用的物質是一些已知的中等程度危險性的并且與人類某些常見疾病相關的物質。操作者必須經過進行相關研究的操作培訓并且由專業科研人員指導。對于易于污染的物質或者可能產生污染的情況進行預先的處理準備。一些可能涉及或者產生有害生物物質的操作過程都應該在生物安全柜內進行，在這些條件下使用二級的生物安全柜。

生物安全等級P3

進行試驗研究的物質一般都是本土或者外來的有通過呼吸傳染使人們致病或者有生命危險的可能的物質。我們需要保護一切在周圍環境中等操作者免于暴露于這些有潛在危險的物質中。通常使用二級或者三級的生物安全柜是必需的。

生物安全等級P4

進行試驗研究的物質是一些非常高危險性并且可以致命的有毒物質，可以通過空氣傳播并且現今并沒有有效的疫苗或者治療方法來處理。操作者必須經過熟練的關于進行這種非常高危險性物質研究的培訓，并且應該很熟悉一些相關操作，保護設施，實驗室設計等等方面對于這些高危險性物質的預防。同時也必須由在此研究領域非常有經驗的科研人員進行指導。對于實驗室的進出應當嚴格的進行控制，實驗室一定要單獨的建造或者建造在一棟大樓中于其他任何地方都分離開的獨立房間內，并且要求有詳細的關于研究的操作手冊進行參考。在這樣的實驗研究中三級的生物安全柜是必需的。

生物安全柜柜內操作主要注意事項：

1、緩慢移動原則：為了避免影響正常的風路狀態，柜內操作時手應該盡量平緩移動。

2、物品平行擺放原則：為了避免物品和物品之間的交叉污染現象產生，在柜內擺放的物品應該盡量呈橫向一字擺開，避免回風過程中造成交叉污染。同時避免堵塞背部回風隔柵影響正常風路。

3、避免震動原則：柜內盡量避免震動儀器（例如離心機、旋渦振蕩器等）的使用，因為震動會使得積留在濾膜上的顆粒物質抖落，導致操作室內部潔凈度降低，同時如果在前操作面平衡失敗還會引起安全柜對操作者的污染。

4、不同樣品柜內移動原則：柜內兩種及以上物品需要移動時，一定遵循低污染性物品向高污染性物品移動原則，避免污染性高的物品在移動過程中產生對柜體內部的大面積污染。

5、明火使用原則：柜內盡量不要使用明火！因為在明火使用過程中產生的細小顆粒雜質將被帶入濾膜區域，這些高溫雜質會損傷濾膜。無法避免一定需要使用的時候，宜使用低火苗的本生燈。

生物安全柜操作及使用方法

1.生物安全柜的選擇

主要根據下列所需保護的類型來選擇適當的生物安全柜：實驗對象保護；操作危險度1～4級微生物時的個體防護；暴露于放射性核素和揮發性有毒化學品時的個體防護；或上述各種防護的不同組合。表1列出了每一種防護類型所推薦使用的生物安全柜。

操作揮發性或有毒化學品時，不應該使用將空氣重新循環排入房間的生物安全柜，即不與建筑物排風系統相連接的Ⅰ級生物安全柜，或Ⅱ級A1型及Ⅱ級A2型生物安全柜。Ⅱ級B1型安全柜可用于操作少量揮發性化學品和放射性核素。Ⅱ級B2型安全柜也稱為全排放型安全柜，在需要操作大量放射性核素和揮發性化學品時，必須使用這一類型的安全柜。

2.實驗室中生物安全柜的使用位置

空氣通過前面開口進入生物安全柜的速度大約為0．45 m/s。這樣速度的定向氣流是極易受到干擾的，包括人員走近生物安全柜所形成的氣流、打開窗戶、送風系統調整以及開關門等都可能造成影響。因此，zui為理想的是，生物安全柜應位于遠離人員活動、物品流動以及可能會擾亂氣流的地方。在安全柜的后方以及每一個側面要盡可能留有30 cm的空間，以利于對安全柜的維護。在安全柜的上面應留有30～35 cm的空間，以便準確測量空氣通過排風過濾器的速度，并便于排風過濾器的更換。

3.操作者

生物安全柜如果使用不當，其防護作用就可能大大受到影響。操作者在移動雙臂進出安全柜時，需要小心維持前面開口處氣流的完整性，雙臂應該垂直地緩慢進出前面的開口。手和雙臂伸入到生物安全柜中等待大約一分鐘，以使安全柜調整完畢并且讓里面的空氣“掃過”手和雙臂的表面以后，才可以開始對物品進行處理。要在開始實驗之前將所有必需的物品置于安全柜內，以盡可能減少雙臂進出前面開口的次數。

3.物品放置

Ⅱ級生物安全柜前面的進氣格柵不能被紙、儀器設備或其他物品阻擋。放入安全柜內的物品應采用70%酒精來清除表面污染?？梢栽谙緞┙竦拿砩线M行實驗，以吸收可能濺出的液滴。所有物品應盡可能地放在工作臺后部靠近工作臺后緣的位置，并使其在操作中不會阻擋后部格柵?？僧a生氣溶膠的設備（例如混勻器、離心機等）應靠近安全柜的后部放置。像有生物危害性的廢棄物袋、盛放廢棄吸管的盤子以及吸濾瓶等體積較大的物品，應該放在安全柜內的某一側。在工作臺面上的實驗操作應該按照從清潔區到污染區的方向進行。

耐高壓滅菌的生物危害性廢棄物袋以及吸管盛放盤不應放在安全柜的外面，否則在使用這些物品時雙臂就必須頻繁進出安全柜，這樣會干擾安全柜空氣屏障的完整性，從而影響對人員和物品的防護。

安全柜內的空氣可以通過HEPA過濾器按下列方式排出：（a）排到實驗室中，然后再通過實驗室排風系統排到建筑物外面；（b）通過建筑物的排風系統排到建筑物外面；（c）直接排到建筑物外面。HEPA過濾器可以裝在生物安全柜的壓力排風系統（the exhaust plenum）里，也可以裝在建筑物的排風系統里。有些Ⅰ級生物安全柜裝有一體式排風扇，而其他的則是借助建筑物排風系統的排風扇。

Ⅰ級生物安全柜是zui早得到認可的，并且由于其設計簡單，目前仍在世界各地廣泛使用。Ⅰ級生物安全柜能夠為人員和環境提供保護，也可用于操作放射性核素和揮發性有毒化學品。但因未滅菌的房間空氣通過生物安全柜正面的開口處直接吹到工作臺面上，因此Ⅰ級生物安全柜對操作對象不能提供切實可靠的保護。

Ⅱ級生物安全柜在應用細胞和組織培養物來進行病毒繁殖或其他培養時，未經滅菌的房間空氣通過工作臺面是不符合要求的。Ⅱ級生物安全柜在設計上不但能提供個體防護，而且能保護工作臺面的物品不受房間空氣的污染。Ⅱ級生物安全柜有四種不同的類型（分別為A1、A2、B1和B2型），它們不同于Ⅰ級生物安全柜之處為，只讓經HEPA過濾的（無菌的）空氣流過工作臺面。Ⅱ級生物安全柜可用于操作危險度2級和3級的感染性物質。在使用正壓防護服的條件下，Ⅱ級生物安全柜也可用于操作危險度4級的感染性物質。